63250 AAV Purification Maxi Slurry Kit ( 1- 10 preps )
- Výrobce: Norgen Biotek
- Kat. číslo výrobce: 63250
| Kód produktu: | 63250 |
| Cena bez DPH: | 31 500,00 Kč |
| Cena s DPH: | 38 115,00 Kč |
| Dostupnost: | Týden |
63250 AAV Purification Maxi Slurry Kit ( 10 preps )
Zahušťování a čištění AAV vektorů z buněčného lyzátu a buněčných kultivačních médií
Rekombinantní adenoasociované vektory (AAV) jsou velmi slibnými nástroji pro in vitro i in vivo genový transfer. Sady Norgen pro čištění AAV poskytují rychlé a jednoduché postupy pro zahušťování a čištění AAV vektorů z buněčného lyzátu a buněčných kultivačních médií. Čištění je založeno na srážení na speciální pryskyřici společnosti Norgen Biotek. Kontaminující buněčné zbytky jsou z vzorku z velké části odstraněny odstředěním, zatímco kontaminující DNA a RNA jsou redukovány enzymatickým štěpením. AAV vektory čištěné tímto způsobem jsou vysoce aktivní pro použití v experimentech s transdukcí in vitro a in vivo.
Sada pro purifikaci AAV od společnosti Norgen obsahuje dostatečné množství materiálu pro 15 příprav (33,5 ml na přípravu supernatantu (SN) nebo celkem 500 ml vstupního supernatantu). Na jednu přípravu lze purifikovat přibližně 1 ml buněčného peletu, celkem až 15 ml buněčného peletu pro celou sadu. Až 33násobná koncentrace vzorkuZahušťování a čištění AAV vektorů z buněčného lyzátu a buněčných kultivačních médií
Rekombinantní vektory adeno-asociovaného viru (AAV) jsou velmi slibnými nástroji pro in vitro i in vivo přenos genů. Sady pro purifikaci AAV od společnosti Norgen poskytují rychlé a jednoduché postupy pro koncentraci a purifikaci vektorů AAV z buněčného lyzátu a buněčných kultivačních médií. Čištění je založeno na srážení na speciální pryskyřici společnosti Norgen Biotek. Kontaminující buněčné zbytky jsou z vzorku z velké části odstraněny odstředěním, zatímco kontaminující DNA a RNA jsou redukovány enzymatickým štěpením. AAV vektor čištěný tímto způsobem je vysoce aktivní pro použití v experimentech s transdukcí in vitro a in vivo.
Každá odstředivková kolona je schopna koncentrovat a purifikovat AAV z 45 ml až 90 ml vstupního materiálu, který se skládá z buněčného peletu, buněčného kultivačního média nebo buněk a kultivačního média smíchaných dohromady. Až 200násobná koncentrace vzorku. AAV vektor purifikovaný tímto způsobem je vysoce aktivní pro použití v experimentech in vitro transdukce a je eluován do malého objemu (1–10 ml) pomocí volitelného kroku koncentrace. Sada může být použita k čištění až 1 x 900 ml vzorků nebo 10 x 45–90 ml vzorků pomocí přiložených kolon. Doba přípravy 1 x 900 ml vzorku je přibližně 2,5 až 3,5 hodiny, přičemž volitelný krok koncentrace vyžaduje dalších 30 minut.
Vlastnosti
- Čištění AAV z jakéhokoli vstupu – buněčné frakce nebo mediální frakce.
- Vysoká výtěžnost AAV, až 90 %.
- Není potřeba žádné speciální vybavení.
- Čištění z různých sérotypů AAV (včetně AAV6 a AAV9).
- Výsledkem je vysoce aktivní AAV pro in vivo a in vitro experimenty.
- Čištění je založeno na spinové kolonové chromatografii, která využívá separační matrici z pryskyřice Norgen.
Specifikace
- Kapacita kolony Minimálně 1 x 1010 částic AAV stanovených pomocí qPCR
- Serotyp vektoru AAV Libovolný
- Průměrná výtěžnost 50–80 %
- Typ vstupu Buňky, média nebo směs
- Objem vstupu: 90 ml–900 ml
- Minimální objem eluce 1 ml–10 ml
- Doba potřebná k dokončení purifikace 2,5–3,5 hodiny
- Skladovací podmínky a stabilita produktu: DNAáza I a RNAáza A by měly být po dodání skladovány při teplotě -20 °C. Eluční pufr O by měl být po dodání skladován při teplotě 4 °C s pevně uzavřeným víčkem. Všechny ostatní roztoky by měly být uchovávány pevně uzavřené a skladovány při pokojové teplotě. Po otevření by roztoky měly být skladovány při teplotě 4 °C. Tato souprava je stabilní po dobu 1 roku od data dodání.
Složení kitu
- Lyzační pufr S: 20 ml
- DNAáza I: 210 μl
- RNAáza A: 240 μl
- HL-SAN nukleáza: neobsahuje
- Vazebný pufr A: 2 x 8 ml
- Čisticí roztok C: neobsahuje
- Čisticí roztok D: neobsahuje
- Promývací roztok C: 3 x 60 ml
- Suspenze E: 2 x 14,5 ml
- Eluční pufr O: 66 ml
- Neutralizátor proteinů: 4 ml
- Spinové kolony: neobsahuje
- Mini spinové kolony: neobsahuje
- Midi spinové kolony (šedý obsah) se sběrnými zkumavkami: 10
- Midi spinové kolony (bílý obsah) se sběrnými zkumavkami: neobsahuje
- Maxi spinové kolony (šedý obsah) se sběrnými zkumavkami: 10
- Maxi spinové kolony (bílý obsah) se sběrnými zkumavkami 10
- Sběrné zkumavky: neobsahuje
- Eluční zkumavky (1,7 ml): neobsahuje
- Midi eluční zkumavky (15 ml): 10
- Maxi eluční zkumavky (50 ml): 10
- Příbalový leták
Dokumenty
