58800 Urine Exosome Purification and RNA Isolation Maxi Kit ( 15 preps )

58800 Urine Exosome Purification and RNA Isolation Maxi Kit ( 15 preps )

Kity Norgen Exosome Purification and RNA Isolation představují komplexní řešení „vše v jednom“ pro purifikaci exozomů a následnou izolaci exozomální RNA z různých objemů vzorků moči. Purifikace je založena na chromatografii na spinových kolonkách využívající proprietární pryskyřici společnosti Norgen.

Tyto kity jsou navrženy k izolaci RNA všech velikostí, včetně mikroRNA, bez ohledu na velikost nebo obsah GC a bez zkreslení. Oproti jiným dostupným kitům poskytují jasnou výhodu v tom, že nevyžadují žádné speciální přístrojové vybavení, činidla pro precipitaci proteinů, prodlužovací zkumavky ani ošetření fenolem/chloroformem či proteázami.

Kity navíc umožňují eluovat RNA do flexibilního elučního objemu v rozmezí 50–100 µL. Vyčištěná RNA je zbavena veškeré cirkulující RNA vázané na proteiny a vykazuje nejvyšší integritu.

Izolovaná RNA je vhodná pro řadu následných aplikací, včetně real-time PCR, reverzně transkripční PCR (RT-PCR), Northern blotu, RNase protection assay, primer extension a expresních analýz pomocí mikroarray.

Vlastnosti

• Purifikace a obohacení intaktních močových exozomů pro funkční studie
• Izolace RNA všech velikostí, včetně mikroRNA, bez ohledu na velikost nebo obsah GC, a to bez zkreslení
• Flexibilní vstupní objemy moči
• Nevyžaduje fenolové extrakce, ošetření proteinázou K ani nosnou RNA
• Není nutná časově náročná ultracentrifugace, filtrace ani speciální stříkačky
• Nejsou potřeba žádná precipitační činidla ani inkubace přes noc
• Kompatibilní s močí většiny druhů
• Purifikované exozomy jsou čisté a neobsahují žádné další proteiny vážící RNA
• Purifikace je založena na chromatografii na spinových kolonkách využívající proprietární pryskyřici společnosti Norgen
• Vyčištěná RNA je vhodná pro širokou škálu následných aplikací, včetně sekvenování malých RNA (Small RNA Sequencing).
   

Specifikace

• Minimální vstupní objem moči: 250 µL
• Maximální vstupní objem moči: 1 mL
• Velikost purifikovaných exozomů: 40–150 nm
• Velikost purifikované RNA: Všechny velikosti, včetně miRNA a malé RNA (< 200 nt)
• Eluční objem: 50–100 µL
• Čas potřebný k provedení 10 purifikací: 35–40 minut
• Průměrné výtěžky: Proměnlivé v závislosti na typu vzorku
• Podmínky skladování a stabilita produktu: Všechny pufry by měly být uchovávány těsně uzavřené při pokojové teplotě. Tento kit je stabilní po dobu 2 let od data odeslání. Pokud je pozorována precipitace solí, doporučuje se zahřát lyzační pufr A po dobu 20 minut při 60 °C.
• Důležitá poznámka: Vzorky moči skladované při −70 °C, −20 °C nebo při 4 °C mohou vytvářet precipitáty v důsledku agregace některých vysoce zastoupených proteinů v moči. Odstranění těchto precipitátů centrifugací nebo filtrací může vést ke ztrátě exozomů. Tyto precipitáty mohou navíc negativně ovlivnit kvalitu purifikované nukleové kyseliny. Doporučuje se použití Norgen Urine Preservative při odběru vzorků moči. Tento konzervační prostředek je navržen pro uchování nukleových kyselin a proteinů v čerstvé moči při laboratorní teplotě. Jeho složky umožňují skladování vzorků po dobu delší než 2 roky při pokojové teplotě bez detekovatelné degradace močové DNA, RNA ani proteinů.
• Norgen Urine Preservative je dostupný v kapalné formě jako jednorázové ampule (Urine Preservative Single Dose Ampules) i v sušené formě v odběrových a konzervačních zkumavkách (Urine Collection and Preservation Tubes).

Složení kitu

• Slurry E 12,5 mL
• ExoC pufr 50 mL
• ExoR pufr 12 mL
• Lyzační pufr A 20 mL 
• Lyzační aditivum B 2 mL 
• Promývací roztok A 18 mL 
• Eluční roztok A 6 mL
• Mini filtrační spinové kolonky 15
• Mini spinové kolonky 15
• Sběrné zkumavky 15
• Eluční zkumavky (1,7 mL) 30
• Příbalový leták 1

Dokumenty